真空離心濃縮儀已經(jīng)成為食品、生物、化工實驗室中的重要儀器之一,那么真空離心濃縮儀到底是怎么工作的呢,它包括什么部分,和其他濃縮方法相比又有什么不同呢?下面我們一起來了解下吧。
在后期進行生物樣本的檢測時,例如使用電泳、氣象色譜、高效液相色譜、質(zhì)譜等方法,對于樣本的濃度需求較高的實驗中,都可以采用真空離心濃縮的方法獲得高濃度的樣本用于上樣。而真空離心濃縮特別適合較敏感的生物樣本,例如蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)。因此,真空離心濃縮的主要目的是獲得高濃度的樣品而不會產(chǎn)生交叉污染、樣品丟失、樣品變性、樣品活性降低或氧化等問題。
相對于其他濃縮方法,真空離心濃縮法的優(yōu)點是樣品的回收率較高,對環(huán)境的危害比較小,并且一般的真空離心濃縮儀操作較為簡單,無需復雜的實驗設(shè)計等。
真空離心濃縮儀的簡單構(gòu)成一般就包括離心機、連接管線、真空泵三個部分,
完整的系統(tǒng)除離心機、連接管線及真空泵之外還包括︰冷阱、燒瓶、化學阱和吸收柱、真空控制閥、真空壓力計、手推車等。
真空離心濃縮的原理∶利用真空泵在濃縮儀內(nèi)形成真空,儀器內(nèi)起亞降低,從而使樣品的溶劑沸點降低,溶劑能夠在低溫下沸騰蒸發(fā)﹔另外能夠在儀器腔體內(nèi)增加一定的熱量,從而提高蒸發(fā)速率,但是不會對樣品的溫度產(chǎn)生影響,樣品自身溫度不會升高;樣品在適宜的離心轉(zhuǎn)速下會產(chǎn)生少量的離心力,這個離心力防止了由于樣品爆沸而產(chǎn)生的損失,同時也避免了由于加熱和離心引起的離心管內(nèi)產(chǎn)生大量泡沫的現(xiàn)象。真空效益:1)在一定的氣壓下,樣品溶劑的沸點是固定的。2)對不同的溶劑施加不同的能量(加熱),對樣品溫度不會產(chǎn)生任何影響,因為樣品的特定的氣壓下沸點是一定的,只要蒸發(fā)還在進行,樣品的溫度就沒有變化。
真空的作用︰
1)低溶劑的氣壓(提高真空度),這是一個關(guān)鍵因素﹔
2)液體的沸點在真空狀態(tài)下會降低;
3)真空同時還能將未濃縮的氣體從腔體中吸走,從而減少蒸汽流向冷阱時的遇到干擾和阻力;
4)通過快速蒸發(fā)溶劑,可保持樣品的低溫狀態(tài)。
能量需求∶
1)能量(熱量)的輸入可補充蒸發(fā)過程所需要的能量,對于加快蒸發(fā)速度是非常重要的﹔
2)能量必須是間接施加給樣品,否則樣品必然會被局部加熱從而導致?lián)p害樣品;
3)真空狀態(tài)下對流是不可能發(fā)生的,因此采用輻射加熱腔體溫度能高達80°C,而樣品的溫度卻能保持在起沸點下(或許是5C),直到樣品干燥了溫度才會上升
4)如果樣品在真空狀態(tài)下沸點很低,在不給樣品施加能量的情況下讓樣品持續(xù)蒸發(fā),樣品很可能會結(jié)冰。